如何利用
ELISA
筛选以及

ELISA实验操作秘籍(elisa实验操作步骤)
ELISA
方法操作的注意事项有哪些呢?相信很多做实验的小伙伴都有这样的疑问,今天小编就给大家总结一下,注意听讲哦!
ELISA
1
ELISA
ELISA
经典的方阵ELISA
OD
P/N>2
OD
1.0
Ag-Ab
但是,对于抗原抗体而言,由于它们被稀释成不同浓度,那么在理论上,每个抗原稀释度情况下,总有一个抗体的稀释度其OD
1.0
OD
1.0
2
ELISA
ELISA
ELISA
ELISA
OD
ELISA
标准曲线可以绘成直线或是曲线(二次方程或三次方程)。通常是选取线性比较好的几个点绘成直线。直线斜率越高说明抗体的特异性及灵敏性好,R2
值越靠近1
抑制率(%
1
B/B0
B0
OD
B
OD
标准差(SD
[
(Xi
B)2/(n
1)]1/2
标准偏差(RSD
SD/B
半数抑制:指用药物(半抗原)去做竞争实验时呈现50%
IC50
OD
ODIC50
0.5?B0
检测下限(LOD
OD
ODLOD=B0
3SD
定量限(LOQ
OD
ODLOQ=B0
10SD
3
ELISA
间接
ELISA
一般有
6
个步骤:包被抗原、封闭、加一抗(在做竞争时同时加入药物)、加二抗、显色、终止。其中除了加显色和终止外,其余步骤之间都要进行洗板。在这里面,每一步都非常重要,假如有一步疏忽都会造成结果的不准确。


