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逆转录试剂盒(逆转录试剂盒原理)

作者:投稿用户     更新时间:2025-11-10     热度:259
内容摘要:逆转录试剂盒(逆转录试剂盒原理)本品为以RNA为模板合成1stStrandcDNA的试剂盒。通过使用不同的逆转录引物本试剂盒既可以合成全长cDNA用于克隆,又可以合成高度均一的cDNA用于qPCR定量。试剂盒所使用的逆转录酶是基于MMLV定向

逆转录试剂盒

国务院联防联控机制“新十条”的发布,逆转录试剂盒,对医院发热门诊的快速检测分流提出了新的要求。记者从上海市科委获悉,伯杰医疗研发的“新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(恒温扩增法)”最近获国家药监局批准上市,将它与一体化核酸快速检测系统搭配,可以让就医人员采样后30分钟左右获得核酸检测结果,逆转录试剂盒,从而有效提升医院发热门诊的检测分流效率。

逆转录试剂盒(逆转录试剂盒原理)

逆转录试剂盒(逆转录试剂盒原理)

与常见的变温扩增法核酸检测试剂盒不同,这款试剂盒采用恒温扩增法,即在核酸扩增环节,不进行反复几十次的升降温处理。因此,采用恒温扩增法的核酸检测在速度上占有明显优势。

然而与变温扩增法相比,恒温扩增法的检测灵敏度一直是影响其广泛应用的因素。在市科委支持下,伯杰医疗通过技术创新,逆转录试剂盒,终于让恒温扩增法的灵敏度达到了变温扩增法试剂盒的水平。国家注册检报告显示,“新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(恒温扩增法)”的检测限达到200拷贝/毫升,与现阶段市场上的核酸检测试剂灵敏度相当。

逆转录试剂盒原理

新型冠状病毒检测试剂供应是否充足?为什么检测会出现假阴性?这些围绕新冠病毒检测的问题一直是全国人民关注的热点。2020年2月5日,王辰院士做客《新闻1+1》栏目,回答白岩松询问"现在我们是否有了更加成熟的快速而准确的检测方式?"时回答:检测方式还主要是对病毒核酸的检测。

同时,2月5日国家卫生健康委员会发布了《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》,公布确诊病例要求,临床诊断病例或疑似病例,具备以下病原学证据之一者:呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸为阳性;或者呼吸道标本或血液标本病毒基因测序,与已知的新型冠状病毒高度同源。

可见,新型冠状病毒患者的临床诊断、治疗监测、隔离解除等过程,与病毒的核酸检测密不可分。

逆转录试剂盒说明书

1.4主要试剂TRIzol™LSReagent购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;高效率逆转录试剂盒购自东洋纺(上海)生物科技有限公司;PremixExTaq™(ProbeqPCR)购自宝日医生物技术(北京)有限公司。

2方法

2.1盲样设置将每种疫苗原始标签去掉后,随机标为疫苗A、疫苗B、疫苗C、疫苗D和疫苗E,再交由检测人员进行检测。

2.2疫苗检测

2.2.1病毒含量测定(细胞测定法)分别将5种活疫苗稀释至1头份/ml,再使用Vero细胞进行PEDV病毒含量的测定,使用ST细胞进行TGEV病毒含量的测定,计算每头份疫苗中所含的PEDV及TGEV的病毒含量。

2.2.2病毒含量测定(荧光定量PCR测定法)分别将5种活疫苗稀释至1头份/ml,逆转录试剂盒,使用探针法对5种活疫苗进行检测。

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逆转录试剂盒(逆转录试剂盒原理)