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Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)

作者:投稿用户     更新时间:2025-11-10     热度:259
内容摘要:Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)关于细胞转染,有许多常用的转染试剂。下面简单介绍下Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项。Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)实验准备:Lipofectamine3000转染试剂、Opti-MEM(可以用无血清的培养基代替)实验步骤1.70–

关于细胞转染,有许多常用的转染试剂。下面简单介绍下

Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项

Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)

Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)

实验准备

Lipofectamine3000转染试剂

Opti-MEM

(可以用无血清的培养基代替)

实验步骤

1.

70–90%

注:对于HEK293,6孔板一般铺50万个细胞左右。对于PC9,24孔板一般铺5-10万个细胞。由于不同细胞,生长状况不太一样,需要根据情况调整。

2.

Opti-MEM

Lipofectamine3000

,充分混匀。

3.

Opti-MEM

DNA

DNA

P3000

4.将上面两步溶液合在一起,混匀并孵育10-15mins。

5.

6.37°C

2–4

注意事项:

1.Opti-MEM需要37℃水浴锅预热。

2.

siRNA

siRNA

P3000

3.

Lipo3000

6

3.75ul

7.5ul

4.Opti-MEM

Lipo3000

Opti-MEM

P3000

15mins

5.

对于比较好转染的细胞,如HEK293

PEI

Lipo3000

CO-IP

10cm

PEI

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Lipo3000转染细胞的步骤及注意事项(lipo3000转染细胞原理)