内容摘要：蛋白质纯化的原理是什么（蛋白质纯化的基本原理）蛋白纯化是指通过基因工程技术将编码蛋白的核酸序列导入到宿主细胞，使其大量表达，再使用适当的纯化方法将其在体外纯化出来，从而获得高纯度、活性和产量的蛋白质。蛋白质表达系统可以分为原核表达系统和真核表达系统两大类。那么你知道蛋白质纯化的原理是什么（蛋白质纯化的基本原理）蛋白质纯化的原
蛋白纯化是指通过基因工程技术将编码蛋白的核酸序列导入到宿主细胞，使其大量表达，再使用适当的纯化方法将其在体外纯化出来，从而获得高纯度、活性和产量的蛋白质。蛋白质表达系统可以分为原核表达系统和真核表达系统两大类。那么你知道
蛋白质纯化的原理是什么（蛋白质纯化的基本原理）
蛋白质纯化的原理是什么
吗？让我们一起来看看吧！
一、乳糖操纵子的负调控
在没有乳糖存在时，
lac
操纵子处于阻遏状态，此时，
I
序列表达
Lac
阻遏蛋白与
O
序列结合，阻碍
RNA
聚合酶与
P
序列结合，抑制转录启动。当有乳糖存在时，乳糖进入细胞，经β
-
半乳糖苷酶催化，转变为异乳糖，异乳糖结合阻遏蛋白，使蛋白构象变化，导致阻遏蛋白与
O
序列解离，从而启动转录。
异丙基硫代半乳糖苷（
IPTG
）的作用与异乳糖相同，是一种作用ji强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。
二、宿主菌株的选择
（
1
）
BL21
是zui常用于原核表达的菌株之一，主要适用于非毒性蛋白的表达，具有大肠杆菌聚合酶，故可适用于
tac
或
trc
等使用大肠杆菌
RNA
聚合酶的原核系统的表达（如：
pGEX
，
pMAL
质粒）。
（
2
）
BL21(DE3)
在
BL21
菌株的染色体上整合了λ噬菌体
DE3
区的
T7
噬菌体
RNA
聚合酶基因，可同时表达
T7RNA
聚合酶和大肠杆菌
RNA
聚合酶，可用于
pET
系列，
pGEX
，
pMAL
等质粒的表达。
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