1、荧光分光光度计种类
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点,可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计,自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Shpol’skill荧光分光光度计,配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

荧光分光光度计(荧光分光光度计常用的光源是)
2、荧光分光光度计构成
1.光源:
为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm范围内强度几乎相等,故较常用。
2.激发单色器:
置于光源和样品室之间的为激发单色器或单色器,筛选出特定的激发光谱。
3.发射单色器:
置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。
4.样品室:
通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。
5.检测器:
一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。
3、荧光分光光度计产品应用
对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析,可应用于生物化学、生物医学、环境化工等部门。
4、荧光分光光度计基本原理
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。
物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态,这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光.
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。
在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
5、荧光分光光度计功能特点
1.荧光发射光谱
选择某一固定波长的光激发样品,记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系,即得荧光发射光谱。
2.荧光激发光谱
选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱。
3.时间分辨技术;
可用于对混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。
时间分辨荧光测定公式如下:
P(t)=P0EXP(-t/τ)
式中P(t):拟合指数函数
P0:强度取值
EXP:指数运算符
t:时间取值
τ:荧光平均时间寿命
6、荧光分光光度计主流产品
上海棱光生产的F96系列、F97系列荧光分光光度计;
天津港东生产的F-380型、F-320型、F-280型荧光分光光度计;
天津拓普生产的WFY-28型荧光分光光度计;
上海三科生产的970CRT型荧光分光光度计;
7、荧光分光光度计编辑推荐
《荧光分光光度计(JJG537-2006)》由中国计量出版社出版。
8、荧光分光光度计目录
1范围
2概述
3计量性能要求
3.1波长示值误差与重复性
3.2检出极限
3.3测量线性
3.4荧光光谱峰值强度重复性
3.5稳定度
4通用技术要求
4.1外观与初步检查
4.2绝缘电阻
5计量器具控制
5.1检定条件
5.2检定项目
5.3检定方法
5.4检定结果的处理
5.5检定周期
附录A检定用工作标准溶液的配制
附录B汞灯谱线的测量方法
附录C荧光池成套性的测量
附录D小二乘法计算公式
附录E荧光分光光度计检定记录格式
附录F检定证书背面格式


